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本公司產(chǎn)品僅供科研使用
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產(chǎn)品簡介
本產(chǎn)品ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒是一種高靈敏度的化學(xué)發(fā)光試劑盒,基本原理是以luminol為基礎(chǔ)的ECL化學(xué)發(fā)光。本產(chǎn)品能與二抗上偶聯(lián)的辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)發(fā)生化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生熒光,通過用X光片壓片或其它適當(dāng)熒光成像設(shè)備(CCD相機等)檢測樣品。
本公司目前生產(chǎn)的ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒有兩種,分別是G2014 ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒和超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒。對于豐度較高的目的蛋白檢測,例如內(nèi)參蛋白等,推薦使用G2014,可檢測含量大于等于2 ng的目的蛋白。而對于低豐度較難檢測的目的蛋白,推薦使用,該產(chǎn)品靈敏度較G2014提高至少5倍,可檢測到pg級含量的蛋白,且發(fā)光更穩(wěn)定。
儲存與運輸
冰袋(wet ice)運輸;4℃避光保存,有效期12個月。如果長期不用,可以-20℃保存更長時間。
操作步驟
1. 配制ECL工作液:將ECL A液和ECL B液等體積混合,注意4℃避光保存?,F(xiàn)配現(xiàn)用,2天內(nèi)使用。
2. Western實驗中PVDF膜經(jīng)二抗孵育后,多次洗滌,濾紙吸去多余液體。在曝光匣上貼兩層PE手套或者其他透明薄膜,將PVDF膜的蛋白面朝上放在曝光匣兩層薄膜之間,加入混合好的ECL工作溶液覆蓋在膜上放置1-2 min。
3. 用濾紙或吸水紙吸去ECL工作液,蓋上層薄膜開始壓膠片。
4. 壓完的膠片用顯影、定影試劑進(jìn)行顯影和定影。根據(jù)發(fā)光強度調(diào)整曝光條件。
注意事項
1. ECL A液和B液在吸取過程中必須要更換吸頭,A液和B液相互污染后會導(dǎo)致A液或B液逐漸失效,另外金屬離子的污染會降低本試劑的靈敏度,請注意用干凈吸頭。使用后密封保存。
2. 如果曝光后背景很深,可能原因有二抗?jié)舛冗^高,或一抗?jié)舛冗^高,或者封閉液不合適,換用其他封閉液。
3. 如果熒光迅速淬滅,可能原因是目的條帶熒光過強,導(dǎo)致HRP迅速消耗ECL。
4. 如果沒有發(fā)光信號,可能是目的蛋白表達(dá)很弱,可延長壓片時間。
5. 操作時請穿實驗服,佩戴一次性手套
本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!
合肥萬物生物科技有限公司
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